摘要 : 目的：研究肿瘤相关巨噬细胞来源的外泌体介导 legumain 在乳腺癌转移中的作用。方法：通过共培养体系，用免疫荧光染色，免疫印迹法等 观察 WT 和 legumain-/- M2 型巨噬细胞自噬途径的变化。应用免疫印迹法观察其下游抑炎性通路 JAK/STAT3，PI3K/AKT 的变化，全面评估促炎性通 路和抑炎性通路对 M2 型巨噬细胞炎症反应失衡的影响。建立自发性乳腺转移模型和实验性乳腺转移模型并寻找更优的自噬的调节条件来进一步评价 leg umain 参与的调节对肿瘤发展的影响。动物植入肿瘤实验，利用 legumain 髓系条件敲除鼠系统的评估巨噬细胞自噬，炎症与肿瘤发展的关系筛选合适的 PI3K 抑制剂，为肿瘤治疗探寻新靶点。结果：legumain 对巨噬细胞吞噬的影响结果表明，legumain 参与了细胞内含体-吞噬体-溶酶体途径。当 LEGUM AIN-/- M2 巨噬细胞与 MDA-MB-231 细胞共培养后，观察发现大颗粒黄色亮斑明显比静息状态下聚集更明显，MDA-MB-231 细胞可以诱导 M2 巨噬细胞自噬发生；LPS 和 MDA-MB-231 细胞刺激后，p62 在 legumain-/- M2 巨噬细胞中的累积明显高于在 WT M2 巨噬细胞中，EP-/-M2 巨噬 细胞中 TRAF6 K63 泛素化修饰明显增强，伴随 NF-κB 信号通路 IKKα/β-IκBα-p65 活化的增强，即在 LEGUMAIN-/-M2 巨噬细胞中磷酸化 IKKα/β 显著增多，IκBα 降解，促进 p65 的磷酸化，促炎通路 NF-κB 增强促进 TNFα 分泌增多。乳腺癌细胞系 MDA-MB-231 建立自发性乳 腺转移模型和实验性乳腺转移模型，实验结果显示 legumain 缺失小鼠乳腺转移增强。legumain 高表达于多种肿瘤细胞，敲低 l
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